血漿游離血紅蛋白測定方法
			  點擊次數:1565 更新時間:2016-06-27
			    分析:血漿游離血紅蛋白測定方法
  
ELISA試劑盒實驗原理
  
血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態氧,使鄰甲聯苯胺氧化發生顏色變化,由無色zui終變為藍紫色。根據顯色深淺與標準進行比較,可測出其含量。
  
實驗方法
  
材料:
  
1.2g/L鄰甲聯苯胺溶液
  
2.1%H2O2
  
3.10%醋酸溶液
  
4.分光光度計
  
方法:
  
1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。
  
2.按下表進行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調零,測定測定管的吸光度。
              
  
3.計算公式
  
血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×100
  
實驗結果計算
  
參考范圍:0-40mg/L
  
注意事項
  
1.一切容器避免血紅蛋白污染;
  
2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時分離,防止人為溶血;
  
3.鄰聯苯胺溶液具致癌性,檢測時要小心,廢液要妥善處理,以免污染;
  
4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準確
          ELISA試劑盒實驗原理
血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態氧,使鄰甲聯苯胺氧化發生顏色變化,由無色zui終變為藍紫色。根據顯色深淺與標準進行比較,可測出其含量。
實驗方法
材料:
1.2g/L鄰甲聯苯胺溶液
2.1%H2O2
3.10%醋酸溶液
4.分光光度計
方法:
1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。
2.按下表進行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調零,測定測定管的吸光度。
| 試劑 (ml) | 測定管 | 空白管 | 
| 2 g/L鄰甲聯苯胺溶液 | 0.5 | 0.5 | 
| 患者血漿 | 0.02 | / | 
| 1% H2O2 | 0.5 | 0.5 | 
| 混勻后室溫放置10min | ||
| 10%醋酸溶液 | 5.0 | 5.0 | 
| 室溫放置10min | ||
3.計算公式
血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×100
實驗結果計算
參考范圍:0-40mg/L
注意事項
1.一切容器避免血紅蛋白污染;
2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時分離,防止人為溶血;
3.鄰聯苯胺溶液具致癌性,檢測時要小心,廢液要妥善處理,以免污染;
4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準確






 
 
